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本制品是由经过特殊工艺处理的Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、dNTPs (含dUTP)、UDG以及PCR稳定剂和增强剂等组成的试剂盒。经特殊工艺处理后的Taq DNA聚合酶可有效减少由引物错配引起的非特异性扩增，与能提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合，使反应体系中所有引物都能有效延伸，无需额外优化。本制品运用了dUTP-UDG防污染系统，在PCR反应过程中加入dUTP，形成含有dU碱基的扩增产物，产物可在下次PCR反应前，由PCR体系中的UDG酶处理消除，从而有效去除PCR产物残留污染，大大降低由扩增产物污染而导致的假阳性。此制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR（如微卫星分析、基因分型、SNP检测等）、高GC含量（＞60%）等复杂模板的扩增。

• 常规PCR鉴定；
  
• 高产量PCR；
  
• 高通量PCR；
  
• 多重PCR检测。

• 高效性：同一PCR反应体系内可同时检测出多种病原微生物，或对有多个型别的目的基因进行分型。
  
• 系统性：多重PCR适用于成组病原体的检测。
  
• 经济简便性：多种病原体在同一反应管内同时检出，节省时间与试剂，节约经费开支，为临床提供更多更准确的诊断信息。
  
• 高特异性：特殊工艺处理扩增酶，能有效降低非特异性扩增。

• 引物长度保持在22～30bp，GC含量在40～60%，避免GC或AT富含区。选取高特异性引物，避免引物之间形成稳定的二聚体或发夹结构，减小引物间的Tm值差，适当调整引物用量，使每对引物都可以得到有效扩增。
  
• 使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加，避免出现组分不一导致的结果差异。反应液的配制、分装，请一定使用新的枪头，尽量避免污染。
  
• 不同样本组织可以根据情况调整PCR程序。多重PCR变性温度可在94～98℃之间调整，退火温度可在52～62℃之间调整或者采用降温PCR，延伸温度可在64～74℃之间调整，当多条扩增产物长度超过500bp时，需适当延长退火及延伸时间。
  
• 为减少末端扩增加A不完全的现象，最后延伸步骤可采用60℃ 15min或者延长至30min。

• 常用反应体系
  

  成分	用量
  5×Multiplex PCR Buffer	4μL
  上游引物	0.2～1.0μM(终浓度)
  下游引物	0.2～1.0μM(终浓度)
  模板	10～100ng
  Multiplex DNA polymerase Mix	0.8μL
  ddH2O	至20μL

• 推荐的反应程序
  

  循环数	温度	时间
  1	50℃	2min
  1	95℃	2min
  28～35	94℃	20s
  	56℃	20s
  	72℃	1kb/60s
  1	72℃	5min
  1	4℃	保温